
產(chǎn)品詳情
蛋白純化填料專業(yè)服務(wù)商



目錄編號(hào):
NRPB130
產(chǎn)品名稱:
Ni-TED NUPharose Mag
Ni-TED NUPharose Mag是一款金屬螯合親和磁膠,主要用于快速篩選和純化帶組氨酸標(biāo)簽(His-tag)的蛋白。其配基為三羧甲基乙二胺(tris-carboxymethyl ethylene diamine,TED)基團(tuán),配位金屬離子為Ni2+,NUPharose Mag基球是含順磁性材料的瓊脂糖凝膠微球。
與對(duì)應(yīng)的瓊脂糖柱層析填料(Ni-TED NUPharose FF,目錄號(hào)為NRPB58)相比,本產(chǎn)品擁有相同的配基,且保持了親和力(載量)和特異性(選擇性)之間良好的均衡:對(duì)帶組氨酸標(biāo)簽(His-tag)蛋白的結(jié)合量大于20 mg/mL的同時(shí),一步純化后樣品純度可達(dá)90%以上,在洗脫液中Ni2+含量與環(huán)境背景值一致,金屬離子脫落率極低。
本產(chǎn)品的TED配基與Ni2+形成的五配位結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性好,對(duì)螯合劑、還原劑、酸、堿等試劑有著出色的耐受性,可在10 mM EDTA、20 mM β-ME或20 mM DTT等條件下正常使用。Ni-TED NUPharose Mag適合用于下列純化體系:
? 目標(biāo)蛋白中含半胱氨酸或者對(duì)氧敏感,需要添加β-ME或DTT時(shí);
? 目標(biāo)蛋白中含半胱氨酸且有金屬反應(yīng)性,需要添加DTT和EDTA時(shí);
? 目標(biāo)蛋白容易被金屬蛋白酶水解,需要添加EDTA時(shí);
? 目標(biāo)蛋白對(duì)高濃度咪唑敏感,需要降低洗脫液中咪唑濃度時(shí);
? 真核細(xì)胞表達(dá)體系中本身含β-ME或EDTA 的情況;
? 對(duì)產(chǎn)物中金屬離子含量要求嚴(yán)格時(shí)。
與瓊脂糖填料的柱層析操作相比,除了保留Ni-TED配基對(duì)帶Hig-tag蛋白親和層析高純度、高收率、高重現(xiàn)性等特點(diǎn)外,利用磁膠的純化操作還有以下特點(diǎn)和優(yōu)勢:
? 料液一般無需澄清處理,可縮短純化時(shí)間,對(duì)低表達(dá)量料液的富集效果更好;
? 可進(jìn)行手動(dòng)或者自動(dòng)化的批量操作,手動(dòng)操作不依賴于設(shè)備,操作通量高。
本產(chǎn)品不僅適用于帶His-tag標(biāo)簽蛋白的小規(guī)模純化與富集(例如百毫克級(jí)),更可以重復(fù)與放大使用。
產(chǎn)品特點(diǎn)與技術(shù)指標(biāo)
產(chǎn)品名稱 | Ni-TED NUPharose Mag |
目錄編號(hào) | NRPB130 |
基 質(zhì) | 順磁性瓊脂糖微球 |
配 基 | 三羧甲基乙二胺,螯合~25 μmol Ni2+/mL |
粒徑范圍a | 30~100 μm |
結(jié)合量b | ≥20 mg/mL帶組氨酸標(biāo)簽蛋白 |
使用pH | 3~12(推薦的工作pH),3~12(長期穩(wěn)定);2~14(短期穩(wěn)定) |
化學(xué)穩(wěn)定性 | 1)純化緩沖液:常用的水相緩沖液,可含有10 mM EDTA,20 mM β-ME或20 mM DTT。 2)在位清洗(CIP)處理:1 M NaOH、1~2 M NaCl、70%乙醇、30%異丙醇,0.1~0.5%非離子型表面活性劑。 3)在下述溶液中處理特定時(shí)間,磁膠性能保持穩(wěn)定:10 mM NaOH(長期)、0.1 M鹽酸(24 h)、6 M鹽酸胍(24 h)。 |
儲(chǔ)存與運(yùn)輸 | 20%磁膠分散液,含20%乙醇,2~30 ℃保存與運(yùn)輸 |
保質(zhì)期 | 5年 |
關(guān)鍵詞:
Ni-TED NUPharose Mag
所屬分類:
相關(guān)產(chǎn)品